L-WRN（小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞）

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

年齡（性別） 100 days

生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

背景描述：L-WRN細(xì)胞通過(guò)R-spondin 3和noggin共表達(dá)載體轉(zhuǎn)染L-Wnt3A 獲得，并在含有G418和濕霉素b的培養(yǎng)基中選擇穩(wěn)定克隆。

生物安全等級(jí) 2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS(164210)+0.5 mg/mL G-418+0.5 mg/mL hygromycin B＋1% P/S

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠聚集蛋白聚糖(AGC)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： AGC ELISA Kit

Monkey Vascuoar endothelial cell growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3)檢測(cè)試劑盒

RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFree-T3ELISAKit大鼠游離三甲狀腺原

細(xì)胞活力藍(lán)色熒光檢測(cè)試劑盒50次

RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

APOA1重組小鼠 ApoA1 蛋白 Protein

蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白 Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)

RPRD1B重組人 RPRD1B 蛋白 Protein

IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白

SELL Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白

AATK peptide 細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原 0.5mgAATK peptide 細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原

IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白

OMG重組小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 標(biāo)簽) Protein

COLEC12 Protein Rat 重組大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白

CXCL10重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白 Protein

L-WRN（小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞）豌豆凝集素(PSA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat cardiac anscription factor GATA4 大鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4

Humanai-insulieceptoraibody,AIRAELISAKit 人抗胰島素受體抗體(AIRA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCreatineKinaseMBisoenzyme,CK-MB檢測(cè)試劑盒人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織C-TAK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

HumanProstaticAcidPhosphatase，PAPELISAKit人前列腺酸性0酸酶(PAP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

肽酶抑制因子3   英文名稱：   Human Peptidase Inhibitor 3   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PI-3

過(guò)氧化物酶體增殖物活化受體γ   英文名稱：   Human Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PPARγ

0酸化SMAD2/3抗體   英文名稱：   Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   PSMAD2/3 Ab

0酸化核因子κB   英文名稱：   Human phosphor-Nuclear Factor kappa B   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   pNFκB

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。